小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白簡化的程序列表如下：
1、將一級抗體（未標記）與樣品抗原一起孵育。
2、將抗體、抗原復(fù)合物添加到預(yù)先用相同抗原包被的96孔板中。
3、 通過洗滌板除去未結(jié)合的抗體。（樣品中的抗原越多，與孔中的抗原結(jié)合的抗體越少，因此稱為“競爭”。）
4、添加對一抗具有特異性并與酶偶聯(lián)的二抗。小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白(AFP-L2) ELISA kit生物研究中心
5、添加底物，剩余的酶引發(fā)發(fā)色或熒光信號。
6、對于競爭性ELISA，樣品抗原濃度越高，終信號越弱。
競爭性ELISA的主要事件是由原始抗原（樣品抗原）和添加抗原執(zhí)行的競爭性結(jié)合過程。與間接ELISA，三明治式ELISA和直接ELISA相比，競爭性ELISA的程序在某些方面有所不同。競爭法的簡要操作步驟：
1）先加入特異性抗原，使抗原固定結(jié)合于載體表面；
2）加入梯度濃度比例的待測樣品與酶標抗體混合物，并做只加酶標抗體的對照組；
3）加入酶促反應(yīng)底物，發(fā)生顯色反應(yīng)，對比實驗組及對照組的顯色差異，計算未知抗體的量。
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